Cтаршая дочь короля Испании Филиппа III и Маргариты Австрийской. Королева Франции, жена (с 24.11.1615) Людовика XIII. В 1643-51 регентша при малолетнем Людовике XIV.
Продолжавшийся 28 лет брак с Людовиком XIII был отмечен взаимной холодностью, а иногда и откровенной враждебностью супругов. Более того, в 1625 при французском дворе разразился скандал, когда обнаружились нежные чувства к королеве со стороны герцога Бэкингемского. Отношения супругов отравляла постоянная борьба вокруг первого министра кардинала Ришелье: Анна, пытаясь проводить происпанскую политику, стремилась вывести короля из-под его влияния и неизменно подключалась к заговорам против Ришелье. Однако все они заканчивались провалом, и антипатия Людовика к жене возрастала. Ей удалось добиться лучшего отношения при дворе, лишь когда она родила двух сыновей (будущего Людовика ХIV и Филиппа, будущего герцога Орлеанского). Место Ришелье после его смерти в 1642 занял кардинал Мазарини. Он сохранил свой пост, когда Людовик ХIII умер в мае 1643, а Анна стала регентшей при своем пятилетнем сыне. Королева и Мазарини прекрасно ладили (имеются даже предположения, что их связывал тайный брак). Они успешно провели заключительную фазу Тридцатилетней войны, завершившейся заключением Вестфальского мира в 1648, а в 1648–1653 им удалось справиться с Фрондой, движением, выступавшим за введение во Франции конституционного правления. В 1659 был заключен Пиренейский мир с Испанией, по которому границы между двумя странами устанавливались по Пиренейскому хребту и подтверждались права Испании на владения во Фландрии и Нидерландах.
В 1661 году, после смерти Мазарини, когда Людовик XIV стал править самостоятельно, Анна Австрийская удалилась в монастырь Валь-де-Грас.